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產(chǎn)品名稱(chēng)	小鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
商品貨號(hào)	MZ-3752
組織來(lái)源	正常眼組織；小鼠
規(guī)格	5×105cells/T25培養(yǎng)瓶
生長(zhǎng)特性	貼壁
細(xì)胞形態(tài)	內(nèi)皮細(xì)胞樣
培養(yǎng)基	M199培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS、內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞污染	HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
細(xì)胞描述	脈絡(luò)膜新生血管(choroidal neovascularization，CNV)已成為眼科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一，目前多數(shù)體外研究應(yīng)用的是人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞或主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞等容易得到的大血管內(nèi)皮細(xì)胞。由于血管內(nèi)皮細(xì)胞具有器官特異性和組織特異性，用大血管內(nèi)皮細(xì)胞的研究結(jié)果很難客觀、準(zhǔn)確地解釋CNV的發(fā)生機(jī)制。因此，建立脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞(choroidal microvascular endothelial cells，CEC)體外培養(yǎng)體系，對(duì)深入研究CNV相關(guān)疾病具有十分重要的價(jià)值
細(xì)胞傳代步驟	如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟	將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟	待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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