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人乳腺癌組織源性原代細(xì)胞
人乳腺癌組織源性原代細(xì)胞
規(guī)格:
貨期:
編號(hào):MZ-4277
品牌:Mingzhoubio

活化細(xì)胞
凍存細(xì)胞
熒光標(biāo)記細(xì)胞

規(guī)格:
T25瓶
凍存管

產(chǎn)品名稱 人乳腺癌組織源性原代細(xì)胞
商品貨號(hào) MZ-4277
組織來源 中國成年病人手術(shù)后的乳腺癌組織。
規(guī)格 5×105cells/T25培養(yǎng)瓶
生長特性 貼壁
細(xì)胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。
細(xì)胞傳代步驟 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟 將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
病理分類 1、非浸潤性癌:指癌瘤最早階段,病變局限于乳腺導(dǎo)管或腺泡內(nèi),未突破基底膜時(shí)稱非浸 潤癌。 (1)小葉原位癌:起源于小葉導(dǎo)管及未梢導(dǎo)管上皮癌,約占乳腺癌的1.5%。切面呈粉紅色 半透明稍硬顆粒狀區(qū),病變大多呈多灶性,癌細(xì)胞體積較大,形態(tài)一致,但排列紊亂,導(dǎo)管 周圍基底膜完整,常累及雙側(cè),發(fā)展緩慢。 (2)導(dǎo)管內(nèi)癌:發(fā)生于中心導(dǎo)管的原位癌,病變可累及導(dǎo)管范圍廣或呈多中心,散在分布, 切面呈顆粒狀帶灰白或淡黃色小點(diǎn),猶如皮膚粉刺樣內(nèi)容物。 2、早期浸潤癌: (1)早期浸潤小葉癌:小葉原位癌穿過基底膜,向小葉內(nèi)間質(zhì)浸潤,但尚未浸潤至小葉范 圍之外。 (2)早期浸潤導(dǎo)管癌:導(dǎo)管內(nèi)癌少量癌細(xì)胞突破導(dǎo)管基底膜,向間質(zhì)浸潤,但浸潤范圍小。 3、浸潤性癌 癌組織向間質(zhì)內(nèi)廣泛浸潤,形成各種形態(tài)癌組織與間質(zhì)相混雜的圖像。浸潤型癌又分為浸潤 性特殊型癌和浸潤性非特殊型癌。浸潤性非特殊型癌又根據(jù)癌組織和間質(zhì)比例多寡分為:單 純癌、硬癌、髓樣癌。 (1)浸潤性非特殊型癌: ①單純癌:較多見,約占乳腺癌一半以上。癌組織主質(zhì)和間質(zhì)成分接近,癌細(xì)胞常集聚成小 巢,片狀或粗索狀。 ②硬癌:約占乳腺癌總數(shù)10%左右,癌主質(zhì)少,間質(zhì)多為特點(diǎn)。體積小,質(zhì)地硬,切面瓷 白色,癌邊緣呈蟹足狀向周圍浸潤。 ③髓樣癌:約占乳癌總數(shù)10~20%,癌組織主質(zhì)為多,間質(zhì)少。瘤體可達(dá)巨大體積,切面 灰白色,中心部常有壞死。根據(jù)間質(zhì)中淋巴細(xì)胞浸潤程度的不同,可分為兩個(gè)亞型:淋巴細(xì) 胞浸潤少的為非黃型髓樣癌,浸潤多者為典型髓樣癌。后者預(yù)后好,常劃入特殊型浸潤癌內(nèi)。(2)浸潤性特殊型癌 ①乳頭狀癌:大導(dǎo)管內(nèi)癌,極少由大導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤演變來。多見于50~60 歲婦女,腫塊 單發(fā)或多發(fā),部分有乳頭溢液,大多血性,溢液涂片可找到癌細(xì)胞。切面呈棕紅色結(jié)節(jié),質(zhì) 脆,結(jié)節(jié)內(nèi)有粉紅色腐肉樣或乳頭狀組織。此癌生長緩慢,轉(zhuǎn)移也較晚。當(dāng)癌實(shí)質(zhì)一半以上 表現(xiàn)為腺管樣結(jié)構(gòu)時(shí),可診斷為腺癌。 ②粘液腺癌:又名膠樣癌,較少見。發(fā)病年齡大,生長緩慢,境界清楚,切面半透明膠凍樣 物,癌組織中含有豐富粘液,惡性程度較低,腋下淋巴轉(zhuǎn)移較少見。 ③濕疹樣癌:又稱乳腺派杰氏病。此癌形態(tài)上特征為:乳頭、乳暈皮膚呈濕疹樣改變和表皮 內(nèi)出現(xiàn)一種大而有特征性的派杰氏細(xì)胞。此癌多數(shù)合并導(dǎo)管內(nèi)癌和小葉原位癌,部分為浸潤 性導(dǎo)管癌等。
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